過氧化氫酶的活性測定分為化學測定法和光度法兩種：

一、化學測定法：高錳酸鉀滴定法，碘量法。

二、光度法：紫外分光光度法，熒光分析法，化學發光法。 電化學法：極譜氧電極法，電流測定法，電泳一染色法。 放射化學測定法。 簡易氣量測定法。

具體測定如下：

高錳酸鉀滴定法： 過氧化氫酶（CAT）屬于血紅蛋白酶，含有鐵，它能催化過氧 化氫分解為水和分子氧，在此過程中起傳遞電子的作用，過氧 化氫則既是氧化劑又是還原劑。 據此，可根據H2O2的消耗量或O2的生成量測定該酶活力大小。 在反應系統中加入一定量（反應過量）的H2O2溶液，經酶促反 應后，用標準高錳酸鉀溶液（在酸性條件下）滴定多余的H2O2 。  即可求出消耗的H2O2的量。  酶活性用每克鮮重樣品1min內分解H2O2的毫克數 表示： 酶活(mgH2O2/gFW·min)= 式中 A—對照KMnO4滴定毫升數； B—酶反應后KMnO4滴定毫升數； VT—酶液總量（ml）； V1—反應所用酶液量（ml）; W—樣品鮮重（g）； 1.7—1ml 0.1mol/L的KMnO4相當于 1.7mg H2O2。 

紫外分光光度法: H2O2在240nm波長下有強烈吸收，過氧化氫酶能分解過氧 化氫，使反應溶液吸光度(A240)隨反應時間而降低。根據 測量吸光率的變化速度即可測出過氧化氫酶的活性。 以1min內A240減少0.1的酶量為1個酶活單位（u）。 過氧化氫酶活性(u/gFW/min)= 式中 A240 = AS0－ AS0—加入煮死酶液的對照管吸光值； AS1, AS2—樣品管吸光值； Vt—粗酶提取液總體積（ml）； V1—測定用粗酶液體積（ml）； FW—樣品鮮重（g）； 0.1—A240每下降0.1為1個酶活單位（u）； t—加過氧化氫到最后一次讀數時間（min）。 

方法比較： 研究認為，化學滴定法重復性差、緊密度 低、操作繁瑣、檢測線低，不適于大批量 的樣品測定。其優點是不需要任何特殊的 儀器，適用性比較廣泛。 紫外分光光度法具有重現性好，操作簡單、 快速、檢測線相對較低得到優點。但是對 于測定底物或產物改變量方面不太準確。

過氧化氫酶的活性測定總結：

綜上所述，過氧化氫酶活性測定的方法大都基于 過氧化氫酶催化過氧化氫的分解反應：根據反應 生成的氧氣的量、反應剩余的過氧化氫的量或根 據反應時的電子的轉移及電流的變化等。同時， 影響測定結果的因素很多，如過氧化氫的濃度、 酸度、溫度及重金屬的含量等；并且各種方法的 準確性和靈敏度也有一定差異。因此，在測定CAT 活性時，應該根據具體組織種類及測量要求選擇 適合的測定的方法。

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